ICRAC


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AcronymDefinition
ICRACInhibition of Calcium Release-Activated Calcium Current
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Mediante la tecnica de registro electrofisiologico conocida como patch-clamp, en su configuracion de celula entera, la cual permite controlar la composicion de la solucion intracelular medimos ICRAC en celulas Jurkat (una linea celular de linfocitos T humanos) en presencia de altas concentraciones (10 mM) de quelantes de [Ca2.
Asi, el uso de BAPTA como quelante reduciria la inactivacion de ICRAC a traves de la reduccion del tamano de esos microdominios debido a su rapida cinetica de union a [Ca2.
Como prueba adicional para confirmar que el ATP liberado por las mitocondrias es el principal factor implicado en la regulacion de la inactivacion lenta de ICRAC realizamos experimentos donde las celulas eran dializadas con la solucion interna conteniendo 10 mM EGTA, coctel mitocondrial suplementado con distintas concentraciones de MgCl2 y observamos que el porcentaje de inactivacion aumenta al incrementar la concentracion de [Mg2.
Asi, hemos empezado a realizar estudios, acerca del papel modulador de otros componentes implicados en esta regulacion, ademas de estudiar el microambiente en la proximidad del canal y su capacidad para regular ICRAC.
Sin embargo, nuestros resultados apuntan a que, en nuestras condiciones experimentales, la PMCA no modula la inactivacion de ICRAC, debido a que la introduccion en la celula un inhibidor de la PMCA, el vanadato sodico, en presencia de EGTA y del coctel mitocondrial no provoca diferencias en la inactivacion respecto del grupo control no tratado con dicho inhibidor.
Por otro lado, pensamos que la regulacion de ICRAC tambien puede estar determinada por la localizacion de los distintos componentes implicados en su regulacion y esta distribucion podria estar condicionada por la formacion de microdominios estructurales en la membrana plasmatica.