SSAK

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SSAKSouth Sound Area Kayakers (Olympia, WA)
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Los iniciadores utilizados para inducir la mutagenesis de los genes invG/invE (SPI-1) y ssaJ/ ssaK (SPI-2) y amplificar el gen de resistencia a la kanamicina del plasmido pKD4, se muestran en la tabla 2; estos se disenaron con secuencias homologas (36 nucleotidos) a la region del cromosoma adyacente a los genes objeto de delecion [H1 (invF) y H2 (invA) de SPI1 y H1 (ssal) y H2 (ssaL) de SPI2], de las SPI1 y SPI2 (numero de acceso GenBank para SPI1 U08280 y para SPI2 ssaL Y09357, ssaI AJ224892) mas la secuencia correspondiente a P1 y P2 del plasmido PKD4 (20 nucleotidos).
Posteriormente, todas las cepas fueron sometidas a otro proceso de transformacion, con los productos amplificados con los iniciadores disenados para la mutagenesis: SPI1/invF-H1P1 y SPI1/invA-H2P2, SPI2/ssaI-H1P1 y SPI2/ ssaL-H2P2, los cuales amplifican el gen de resistencia a la Km del pKD4 y reconocen las secuencias externas flanqueantes de la region genica, invF - invA y ssaH/ssaI - ssaL, de los genes invG/invE de la SPI-1 y los genes ssaJ/ ssaK de la SPI-2, respectivamente.